Shodex UB系列是水溶性尺寸排阻色譜柱。適用于病毒、病毒樣顆粒(VLP)、外泌體等生物納米產(chǎn)品的分離。

(標(biāo)準(zhǔn)柱)   [外殼材質(zhì) : SUS]

下圖為使用生物納米產(chǎn)品分析純化用水溶性SEC(GFC)色譜柱UB-100與各種檢測器組合，對外泌體(EV)進(jìn)行了分析。UV(280 nm)用于檢測生物源性雜質(zhì)整體，熒光(FL; Ex 280 nm / Em 348 nm)主要用于檢測蛋白質(zhì)（以Trp殘基為指標(biāo)），MALS散射(LS)特別對納米粒子類別的大型目標(biāo)產(chǎn)生高靈敏度的響應(yīng)。此外，通過MALS可以得到目標(biāo)的旋轉(zhuǎn)半徑(RMS radius)的估計(jì)值。
根據(jù)MALS的信息，大約13分鐘附近是以外泌體(EV)為主要組分的區(qū)域，并且從RMS半徑的信息可以推測分子大小存在分布。本次分析使用的EV樣品雖然是純化級別的，但從UV、FL的分析結(jié)果來看，在EV區(qū)域之外也檢測到了峰值，可以推測仍含有雜質(zhì)。
UB-100不僅能夠?qū)σ酝饷隗w(EV)為主的50 nm以上的納米產(chǎn)品進(jìn)行分析純化，以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)的分析，而且還兼顧了產(chǎn)物與生物源性雜質(zhì)的分離。此外，UB-100考慮到了實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的制備應(yīng)用，通過采用27 µm的單分散粒子，實(shí)現(xiàn)了在分析生物源成分的高負(fù)荷工作流程中仍能保持低壓。同時(shí)，UB-100具備高耐堿性，可以用堿清洗，從而提高再現(xiàn)性和減少拖尾效應(yīng)。

樣品: 15 μL
外泌體(EV)

色譜柱：

Shodex UB-100 (8.0 mm I.D. x 300 mm)

流動相：

PBS (-)                

梯度設(shè)置：

0 to 50 % B (0 to 10min), 50 % B (10 to 15 min),

50 to 0 % B (15 to 16 min), 0 % B (16 to 20 min)

流速：

0.6 mL/min

檢測器：

UV (280 nm) (small cell volume),

Fluorescence (Ex. 280 nm, Em. 348 nm),

MALS (Multi angle light scattering)

柱溫：

室溫

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